熒光PCR凍干之二糖

二糖又名雙糖, 雙糖是碳水化合物的一種。它是由兩個單糖分子經縮合反應除去一個水分子而成的糖。例如乳糖由葡萄糖和半乳糖組成，蔗糖由葡萄糖和果糖組成，麥芽糖由兩個葡萄糖組成等。二糖作為常用的凍干保護劑，能夠有效增加蛋白凍干穩定性，但是用它們作保護劑得到的無定形蛋白凍干固體具有較低的Tg，對儲存過程中的高溫和高濕條件耐受較差。大分子量糖能夠增加凍干后固體的Tg，增加凍干后穩定性，但是對于低濃度蛋白活性保護作用不理想。例如蔗糖對蛋白質具有保護作用，葡聚糖在冷凍和干燥過程中不能防止蛋白質變性，而蔗糖與葡聚糖的混合物則大大提高了在冷凍干燥及儲存過程中蛋白質的保護作用。盡管葡聚糖不能單獨作為蛋白質的保護劑，但它具有高Tg，并能提高凍干蛋白質的儲藏質量，因此和蔗糖等其它保護劑混合使用可以防止蛋白質的損傷，提高產品的質量。糖對蛋白質的保護作用的大小和其濃度有關，通常在某個濃度范圍內，糖的保護作用隨著濃度的升高而增大，達到某一濃度時，保護作用達到大值。這時在增大糖的濃度，保護作用不會明顯增加，有時反而會降低。海藻糖作為熒光PCR凍干保護劑的其中一種，既能在冷凍過程中充當低溫保護劑，又能在干燥脫水過程中起到脫水保護劑的作用。由凍干保護劑制備得到的熒光PCR凍干制劑可長期常溫保存，且復溶速度快。